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高氏盆炎方五号方对实验性慢性盆腔炎大鼠抗炎抗粘连作用的研究
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  • 用途:硕士毕业论文 Master Thesis
  • 编辑:若诗
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  • 论文字数:44390
  • 论文编号:el2021041820280122065
  • 日期:2021-04-21
  • 来源:上海论文网
本文是中医论文,然而,在使用中医药治疗慢性盆腔炎的过程中,此病的作用机制和评价因子尚且需要继续研究和验证。尽管在给药途径和内服药物剂型已经有了很多成功的研究,但是大部分是临床观察实验,缺乏基础动物实验研究,在今后的科学研究工作中,我们应不断完善动物实验研究和提供科学实验数据,为建立盆腔炎的中医药标准化治疗体系做贡献。不论哪种致炎剂致炎,其活血化瘀的中药都是有效的。这也说明慢性盆腔炎的病机特点均以血瘀为主。高氏盆炎方五号方由丹参15g、小茴香6g、没药10g、炮姜4g、肉桂10g、赤芍15g、元胡15g、当归10g、桃仁10g、三棱10g、蒲黄10g、莪术10g、五灵脂10g组成,具有活血祛瘀、温经散寒、祛瘀消癥的功效。高氏盆炎方五号方是由少腹逐瘀汤合宫外孕二号方化裁而来,其中少腹逐瘀汤中赤芍活血祛瘀,配合当归养血调经,元胡、没药行气散瘀,消肿定痛,蒲黄生用,重在活血祛瘀,五灵脂用炒,重在止痛而不损胃气,其中赤芍清热凉血,可防本方温燥太过,小茴香、炮姜、肉桂温经散寒,通达下焦,全方有活血祛瘀、温经散寒、散结止痛之功效

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引言

 

本研究将通过实验一(药效学实验:采用苯酚胶浆加机械损伤法致大鼠慢性盆腔炎模型,并通过测定各组大鼠炎症因子IL2、PCT、hsCRP的水平和粘连因子FGF2的表达水平评价高氏盆炎方五号方对CPID大鼠的治疗作用)与实验二(镇痛实验:采用冰醋酸致小鼠扭体实验观察高氏盆炎方五号方的镇痛作用)来综合评价高氏盆炎方五号方对慢性盆腔炎模型大鼠及疼痛小鼠的治疗效果,并分析该方药的抗炎抗粘连及镇痛作用机制,为高氏盆炎方五号方治疗CPID提供科学的药效学实验依据并用于指导临床。宫外孕二号方中丹参、赤芍、桃仁活血化瘀,行气之功,莪术为胜,破血之力,三棱为优,二药配伍既能气血兼顾,又能增强活血行气、祛瘀消癥之力,诸药共奏化瘀止血、杀胚消癥之效。两方化裁合用,既有温经散寒,消癥散结,起到抗粘连的作用,又能活血化瘀,消肿止痛,从而起到抗炎的作用。本方的配伍特点有二:一是方中温清补消并用,但以活血温经为主;二是大队温补药与少量寒凉药配伍,能使全方温而不燥、刚柔相济,以成温养化瘀之剂。

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第1章实验研究实验一高氏盆炎方五号方治疗慢性盆腔炎的药效学和疗效机制研究

 

1.1实验材料
实验地点位于河北中医学院实验中心,室温控制在23~25℃,勤通风,光照条件良好,喂养大鼠所需的饲料及垫料均采购于河北医科大学动物实验中心,大鼠在整个实验过程中可自由摄食和饮水,垫料每3天更换一次,常规饲养7天,适应环境后开始造模实验。高氏盆炎方五号方购自石家庄市中医院中药房,药物组成为丹参15g、小茴香6g、没药10g、炮姜4g、肉桂10g、赤芍15g、元胡15g、当归10g、桃仁10g、三棱10g、蒲黄10g、莪术10g、五灵脂10g,于石家庄市中医院制剂室将其煎熬浓缩成浓度为2.8g/ml的中药溶液,并保存在4℃的冰箱中以备后用。少腹逐瘀颗粒购自吉林敖东延边药业股份有限公司,5g×20袋/盒,生产批号:1708003,国药准字:Z20000041,用蒸馏水溶化为浓度为0.2g/ml的溶液,并保存在4℃的冰箱中以备后用。人胎盘组织液购自湖南一格制药有限公司,2ml×10支/盒,生产批号:201709014,国药准字:S43020001。苯酚凝胶:由河北中医学院药理学实验室提供。FGF2(成纤维细胞因子2)免疫组化试剂盒(上海森雄科技实业有限公司,产品批号:SXR015),hsCRP(超敏C反应蛋白)ELISA检测试剂盒(上海森雄科技实业有限公司),FGF2(成纤维细胞因子2)ELISA检测试剂盒(南京嘉誉达生物科技有限公司,产品批号:JEB15419),PCT(降钙素原)ELISA检测试剂盒(南京嘉誉达生物科技有限公司,产品批号:JEB13880),IL2(白介素2)ELISA检测试剂盒(南京嘉誉达生物科技有限公司,产品批号:JEB13731),TotalRNAkit(OMEGA),qPCRkit(TIANGEN),cDNAkit(TaKaRa)。

 

1.2实验方法
1)造模方法:适应性饲养7天适应环境后,于第8天清晨禁食,随机分成空白组10只,其余65只分别进行慢性盆腔炎造模。使用浓度为2%的戊巴比妥钠按50mg/kg的剂量对大鼠进行腹腔麻醉,待麻醉满意后,将大鼠取仰卧位固定,剪去手术区被毛,碘伏消毒,于大鼠下腹正中作切口,长约1cm左右,从膀胱后找到子宫,暴露并固定,首先用注射器针头机械损伤大鼠左侧子宫内膜组织,再用含有25%苯酚凝胶的1ml注射器从子宫分叉处进针,向大鼠左侧子宫内注入0.06ml,之后立即夹闭针孔,防止苯酚凝胶从此处流出,垫高大鼠臀部偏向于右侧,防止苯酚凝胶在子宫内流出,之后将子宫纳入腹腔,逐层缝合切口,碘酊消毒术区皮肤,将大鼠伤口使用敷料覆盖包扎。2)成模标准:于造模后第10天(根据临床观察和国家规划教材,慢性盆腔炎大多发生在盆腔炎性疾病急性发作后的第4~8周,因大鼠的动情周期为4~5天,而人的月经周期为4周左右,所以大鼠在10天左右形成慢性炎症而成模),随机抽取5只大鼠,开腹取子宫组织,光镜下可见子宫壁增厚,正常组织被破坏,慢性炎细胞浸润,以淋巴细胞为主,表明CPID大鼠模型建立成功。3)分组:将余下60只大鼠随机平均分为生理盐水组、少腹逐瘀颗粒组、高氏盆炎方五号方高、中、低剂量组、人胎盘组织液组,每组10只。加上空白组,共7个实验组。

 

引言........................................................................................................................1
第1章实验研究........................................................................................................3
实验一高氏盆炎方五号方治疗慢性盆腔炎的药效学和疗效机制研究................3
1.1实验材料..........................................................................................................3
1.2实验方法..........................................................................................................4
1.3实验一技术路线图(大鼠药效学实验)......................................................6
1.4慢性盆腔炎诊断标准......................................................................................7
1.5检测指标及方法..............................................................................................7
1.6统计学方法....................................................................................................10
1.7实验结果........................................................................................................10
实验二高氏盆炎方五号方镇痛实验研究..............................................................18
第2章综述.....................................................................................................37
2.1中西医对慢性盆腔炎的治疗进展.........................................................................37
2.1研究背景...................................................................................................37
2.2诊断标准...................................................................................................37
2.3中医学关于慢性盆腔炎的认识和诊疗概况...........................................38
2.4西医学关于慢性盆腔炎的认识和诊疗概况...........................................44
结论...............................................55

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第2章综述中西医对慢性盆腔炎的治疗进展

 

2.1研究背景
盆腔炎性疾病是由于女性生殖器官的自然防御功能减低导致病原体侵入女性内生殖器及其盆腔内周围结缔组织而发生炎症的疾病,是妇科临床上的常见病,近年来发病率较高。慢性盆腔炎往往是由于急性盆腔炎治疗失当,病情缠绵难愈而形成[1]。CPID患者常有小腹疼痛或隐痛、伴有腰骶部酸痛、阴道分泌物增多、双侧或单侧附件区增厚或有炎性包块等的临床表现,进一步还可导致月经量多或错后,慢性输卵管,输卵管闭锁,进而不孕[2]。尚且在中医古典医籍中没有找到关于此种疾病的专属病名记录,更无专病论述章节。张仲景在《金匮要略》中首次提到了CPID的症状“妇人六十二种风,及腹中血气刺痛,红蓝花酒主之。”慢性盆腔炎反复发作、病程较长、发病率逐年上升趋势的特点严重影响了女性同胞的生活质量。
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2.2诊断标准
临床主要症状是下腹坠痛或胀痛,亦或长时间绵绵作痛,常伴有腰骶部酸痛;如有长期炎症刺激所致的盆腔粘连,则经期前后、劳累后及性交后腹痛极易加重。阴道分泌物量多,色白或黄,质稠或稀,有异味。常会影响到女性的月经,多发生月经量多及经期延长。大多数患者全身症状不明显,少数患者可见低热、疲乏,部分久病缠绵患者可出现神经衰弱症状。因盆腔粘连导致输卵管闭锁,可导致不孕及异位妊娠。子宫或附件压痛、子宫颈举痛,已排除其他疾病且符合上述条件之一为诊断最低标准。史艳馨等[17]以温阳化瘀汤为基本方治疗,具体方剂为:黄芪、鸡血藤、车前草各25g,茯苓、泽泻各20g,赤芍、益母草、败酱草、川芎、当归各15g,白术、金银花各10g,附子7g,腹痛明显患者加延胡索15g,白带增多且质稠色黄的患者加薏苡仁25g,黄柏15g。对照组使用西药抗炎治疗。28天后,观察组与对照组的总有效率分别为96.3%和85.19%,差异具有显著性。疗程结束30天后,随访患者6个月,两组的复发率分别为观察组19.05%,对照组39.39%。由此证明,温阳化瘀汤能够改善慢性盆腔炎患者的症状且复发率低。
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结语
采用化学烧伤加机械损伤法可以成功建立大鼠CPID模型,造模成功后大鼠的子宫组织病理上可见成纤维细胞增生、全层皆可见大量炎性细胞浸润,且大鼠的行为学、子宫形态及子宫质量均可见不同程度的变化。生理盐水组大鼠血清中PCT、hs-CRP、IL-2、FGF-2的水平及子宫组织中FGF-2蛋白表达和基因表达与空白组比较差异具有统计学意义。2)高氏盆炎方五号方可以降低CPID模型大鼠子宫组织病理评分等级,显著减轻CPID疾病模型大鼠的子宫肿胀度,即能明显减轻炎性细胞的浸润,改善炎症病变,防止和减轻粘连,使子宫组织得到修复。3)高氏盆炎方五号方能使大鼠血清中IL-2的水平升高,PCT、hs-CRP、FGF-2的水平降低;还可以使大鼠子宫组织中FGF-2的蛋白和基因表达水平下降。4)高氏盆炎方五号方有镇痛作用,且其效果与药物剂量有相关性(疗效高剂量组>中剂量组>低剂量组)。妇科检查时宫颈可有触痛感,宫体多因盆腔粘连而呈后屈位,活动度受限,子宫肌炎时可伴有宫体的压痛,输卵管炎时患侧附件区可触及增厚,并有压痛或可触及条索状增粗,若为输卵管积水,可在附件区触及囊肿,活动度欠佳。彩超或MRI检查显示输卵管增粗或伴管腔积液,或炎性包块伴有盆腔积液;红细胞沉降率升高;白细胞总数或中性粒细胞轻度增高;C‐反应蛋白水平升高;宫腔镜检查病理回报子宫内膜炎,腹腔镜检查可见输卵管积水、盆腔内生殖器有脓性渗出物、或可见盆腔内粘连病灶。
参考文献(略)